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实验原理

蛋白质印迹(Western blot),是根据抗原抗体的特异性结合检测样品中目的蛋白的方法。这种技术是把SDS-PAGE电泳分离的蛋白组分从凝胶转移到一种固相载体(如 PVDF或NC膜)上,以针对某种或某类蛋白的特异性抗体与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应,再与酶标记的第二抗体反应,经过底物显色以检测特异性蛋白的表达水平。

检测流程

1、蛋白样品制备及含量测定;

2、SDS-PAGE电泳;

3、转膜及抗体结合反应;

4、化学发光,显影,定影;

5、凝胶图象分析;

6、提供完整的实验资料(实验记录、胶片等资料)。

样品要求

不接受含有病原体的样品,也不接受所表达目的蛋白质对人体有致病性的样品。

样品中目的蛋白质浓度≥30 ng/ul,该浓度下样品体积≥50 ul;使用干冰运输。

样品分装后放于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

装有样品的Tube管请用石蜡膜封好,以免邮寄过程中样品漏出。

检测周期

实验周期约需2-3周(不含订购一抗时间)。

说明:每张膜上可做一种目的蛋白和相应的内参蛋白,每张膜可以做8个样品。一抗另计,其他试剂免费,一抗订购约需时间为3周。

结果输出

出具完整的实验报告,包括实验步骤、使用仪器和试剂等