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基因敲除/敲入小鼠定制

我们通过基因打靶技术制备基因敲除小鼠模型。制备基因打靶(敲除、敲入)小鼠模型时,先根据需要构建打靶载体,然后转染到胚胎干细胞中,通过药物筛选、长距离PCR及Southern等一系列的鉴定,得到正确中靶的胚胎干细胞克隆,并注射到供体囊胚里面,发育成嵌合鼠。将嵌合鼠与野生型的小鼠交配,如果嵌合鼠的生殖细胞是由植入的胚胎干细胞发育而成,就会将对胚胎干细胞的遗传修饰(如敲除、敲入等)遗传给后代,从而在后代中检测到成功发生基因打靶、并且能够遗传建系的小鼠。

 

论文中注明小鼠来源于南京大学—南京生物医药研究院可获现金奖励:

      奖励条件            奖励额度       

影响因子小于5分         500元

影响因子5—10分        1000元

影响因子10—20分       2000元

影响因子20分以上       5000元

相关已发表文献

我们通过基因打靶技术制备基因敲除小鼠模型。

基因打靶技术是20世纪80年代发展起来的,建立在基因同源重组技术基础以及胚胎干细胞技术基础上的一种分子生物学技术。同源重组是指当外源DNA片段与宿主基因组片段同源性高时,可发生互补结果,结合区的任何部分都有与宿主的相应片段发生交换(即重组)的可能,这种重组称为同源重组。基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。基因打靶技术克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。尤其是条件性、诱导性基因打靶系统的建立,使得对基因靶位时间和空间上的操作更加明确、效果更加精确、可靠,它的发展已经为发育生物学、分子遗传学、免疫学及医学等学科提供了一个全新的、强有力的研究、治疗手段,具有广泛的应用前景和商业价值。

小鼠胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell,ES)是从小鼠囊胚中分离出的内细胞团(Inner cell Mass,ICM)细胞,它具有向各种组织细胞分化的分化潜能,能在体外培养、传代、药物筛选并保留发育的全能性。在体外进行遗传修饰后,重新植回小鼠囊胚,它能同小鼠囊胚(供体)镶嵌发育,即胚胎的部分组织或细胞由供体囊胚发育而成,另一部分组织或细胞则由胚胎干细胞发育而成,这种镶嵌发育得到的小鼠称为“嵌合鼠”。制备基因打靶(敲除、敲入)小鼠模型时,先根据需要构建打靶载体,然后转染到胚胎干细胞中,通过药物筛选、长距离PCR及Southern等一系列的鉴定,得到正确中靶的胚胎干细胞克隆,并注射到供体囊胚里面,发育成嵌合鼠。将嵌合鼠与野生型的小鼠交配,如果嵌合鼠的生殖细胞是由植入的胚胎干细胞发育而成,就会将对胚胎干细胞的遗传修饰(如敲除、敲入等)遗传给后代,从而在后代中检测到成功发生基因打靶、并且能够遗传建系的小鼠。

 

中国第一个CKO模型由我们于2005年制作完成。

8年CKO模型制备经验

每年完成超过200个模型

于2009年开始KO First敲除服务

可使用国际领先的TALENCas9等技术进行基因敲除

一站式服务

 

我们将为您提供最专业最快速最优质的服务!


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