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检测原理

逆转录PCR又称反转录PCR ( Reverse transcriptase PCR,RT-PCR ),是一种由一条RNA单链逆转录为互补DNA(cDNA),继而进行cDNA拷贝扩增的方法。RT-PCR 为反转录RCR(reverse transcription PCR)和实时PCR(real time PCR)共同的缩写。逆转录PCR是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的 RNA,已经广泛应用于遗传病的诊断。RT-PCR的关键步骤在于RNA的反转录,要求RNA模版尽量为完整且不含DNA、蛋白质等杂质。

检测流程

  1. RNA模板制备:细胞/组织的处理、RNA提取、纯化、鉴定(见RNA技术服务)
  2. 引物设计与引物合成:客户提供上、下游引物或者我公司免费设计引物
  3. RNA反转录
  4. 普通PCR扩增
  5. 琼脂糖凝胶电泳
  6. 凝胶成像系统灰度对比分析(含内参)

实验周期

  1. 10个样本 10个工作日
  2. 10~50个样本 20个工作日
  3. 50个样本以上 30个工作日

结果输出

完整的实验操作步骤、电泳图、定性分析结果等。